Interstage HTTP Serverの環境定義ファイル（httpd.conf）において、定義内容の変更を有効にする方法について教えてください。

Interstage Application Serverのよくあるご質問を検索できます。

既に起動しているWebサーバを停止せずに、環境定義ファイル（httpd.conf）の定義変更を有効にする方法はありますか？

ありません。
定義変更を有効にする場合は、必ずWebサーバを再起動してください。